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BCA蛋白质定量测定试剂盒 BCA Protein Quantitation Kit

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      蛋白质定量是蛋白质化学最基本的操作。常见的化学显色测定方法有3种:BCA法,Lowry法和Bradford法。三种方法的灵敏度基本相同。BCA法和Lowry法成熟稳定,是蛋白质精确定量的手段,但用时较长。Bradford法测定简单,成本较低,用时短,广泛用于蛋白质的快速检测;不足之处是数据的稳定性较差。如何选择测定方法取决于蛋白质的性质和测定的用途。如果蛋白质分子中酪氨酸含量低或没有,一般采用BCA和Bradford法。从测定的原理和实际经验看,BCA法是优先推荐的使用。

     

    用途:
      采用BCA(Bicinchoninic Acid)法精确测定蛋白质的浓度。蛋白质中的肽键、半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸和酪氨酸将Cu2+还原成Cu+, Cu+与BCA形成有色复合物。通过测定有色复合物562nm的可见光吸收确定溶液蛋白质的浓度。方法稳定,数据重复性好。广为采用。
    主要参数:
      测定线形范围:5-500ug/ml;反应用时:30分钟;反应温度:37度或60度;反应体积:1ml (根据比色系统,同比例放大或缩小);样品体积:25ul;影响测定的因素:DTT, DTE, EGTA, beta-Mercaptoethanol等;检测波长:562nm;化学兼容性:Urea<3M, Trition <1%, SDS<5%, GuCl<4M,, (NH4)2SO4<1.5M, NP40<5%, NaCl<1M, EDTA<10mM, Glycine<1M, NaAC<0.2M, HEPES<0.1M, DTT<1mM
    组成:
      Solution A ,Solution B ,BSA标准品: 0.5mg/ml
    反应次数:
       K3000反应体系为0.5ml,200次标准反应。酶标板200ul体系,500次测定。
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